芪藤消浊颗粒通过ALKBH5调控TRIM13 mRNA甲基化减轻LPS诱导的肾小球系膜细胞炎症增殖
目的:探讨芪藤消浊颗粒对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肾小球系膜细胞(MMCs)炎症和增殖的影响。方法:添加3 μg/mL LPS诱导小鼠肾小球系膜细胞构建慢性肾小球肾炎体外模型。采用Western blot法和RT-qPCR法检测ALKBH5和TRIM13的表达;通过ELISA技术测定MMCs上清液中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL-10)的水平;甲基化RNA免疫共沉淀法检测TRIM13 mRNA的甲基化水平;通过流式细胞术分析细胞周期与细胞凋亡情况;CCK-8法检测细胞的增殖活性。结果:与正常对照组比较,模型对照组MMCs细胞炎症因子IL-1β、TNF-α含量显著升高,IL-10含量显著降低(P<0.01),P65 NF-κB信号通路激活显著增强(P<0.01),G_(1)/0期细胞计数显著增加(P<0.01),细胞增殖活性显著升高(P<0.01),ALKBH5表达显著上调(P<0.01),而TRIM13 mRNA甲基化表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,芪藤消浊颗粒含药血清处理组炎症因子IL-1β、TNF-α含量显著下调,IL-10含量显著增强(P<0.01),P65 NF-κB信号通路激活显著抑制(P<0.01),G_(1)/0期细胞计数显著减少(P<0.01),细胞增殖活性显著降低(P<0.01),ALKBH5表达显著下调,TRIM13 mRNA甲基化表达显著上调(P<0.01)。此外,ALKBH5过表达的MMCs中,含药血清对细胞凋亡和细胞周期停滞的促进作用显著减弱(P<0.01)。结论:芪藤消浊颗粒通过调节ALKBH5-TRIM13轴,从而减轻MMCs的炎症反应,抑制其过度增殖,对慢性肾小球肾炎发挥治疗作用。
中药药理与临床
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