目的:探索芪黄通秘软胶囊治疗功能性便秘(functional constipation, FC)的作用机制。方法:通过网络药理学预测芪黄通秘软胶囊治疗FC的药效成分、靶点基因及相关通路，根据文献对预测信号通路进行筛选，分子对接预测活性成分与通路靶点的亲和力。将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、芪黄通秘软胶囊0.5、1 g/kg组，造模成功后各组灌胃给予相应药物或生理盐水，观察芪黄通秘软胶囊对FC小鼠粪便质量和含水率、小肠推进率的影响；采用ELISA法检测小鼠血浆中胃泌素(GAS)及胃动素(MTL)的含量；通过Western blot法验证通路靶点的蛋白表达。结果:通过网络药理学及文献调研发现芪黄通秘软胶囊中78个活性成分通过73个作用靶点调控PI3K-AKT、mTOR、MAPK和IL-17等8条信号通路发挥治疗FC的作用，主要涉及细胞凋亡、基因的表达调控等生物过程；分子对接结果显示，槲皮素、木犀草素、大黄酚等活性成分与PIK3CG、AKT1均有较高的亲和力。动物实验结果表明，与正常对照组比较，模型对照组小鼠粪便质量、含水率及小肠推进率明显降低(P0.05或P0.01),结肠组织中p-PI3K、p-AKT、PI3K、AKT的蛋白表达显著下调(P0.01);与模型对照组比较，芪黄通秘软胶囊各组小鼠粪便质量、含水率及小肠推进率明显增加(P0.05或P0.01),芪黄通秘软胶囊1.0 g/kg组小鼠血浆中GAS、MTL的含量显著增加(P0.01),结肠组织中p-PI3K、p-AKT、PI3K、AKT的蛋白表达明显上调(P0.05或P0.01)。结论:芪黄通秘软胶囊可能通过调控PI3K-AKT信号通路，升高GAS、MTL的含量，调节肠道运动从而发挥治疗FC的作用。