目的:基于网络药理学和动物实验，探讨加味生脉方治疗急性高原病(acute mountain sickness, AMS)大鼠的药理作用及机制。方法:在TCMSP、ETCM、GeneCards、DisGenet数据库分别检索加味生脉方的主要活性成分与靶点，AMS疾病靶点。运用STRING数据库进行蛋白质相互作用分析，借助David平台进行基因本体GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。对大鼠进行预防给药7 d,再将大鼠置于低压氧舱中，构建急性高原病大鼠模型，检测大鼠的血气指标、白细胞(WBC)数量、炎症指标、氧化应激指标、心肌酶谱、心肌损伤标志物和心肌线粒体酶活性；用蛋白印迹法检测大鼠心肌组织中相关通路的表达。结果:加味生脉方筛选出62个活性成分，主要有苯代南蛇碱、阿朴天仙子碱、灌木远志酮A、高丽槐素等，与AMS筛选出66个共同作用靶点，核心靶点包括ESR1、CA2、EGFR、CA1、MAPK14等；GO富集在BP中主要体现为丝裂原活化蛋白激酶调控和一氧化氮生物合成调控等；MF主要体现为受体复合物和溶酶体等；CC主要体现为类固醇和蛋白磷酸酶等；KEGG富集发现HIF-1、AGE-RAGE等信号通路能在加味生脉方治疗急性高原病中起重要作用。动物实验结果显示，与正常对照组相比，模型对照组血液中血气指标显著降低，血清中炎症因子、心肌酶谱和心肌损伤标志物含量明显升高(P0.05或P0.01),心肌组织中氧化应激水平显著升高，线粒体呼吸链酶活性显著降低，P53、HIF-1α蛋白表达明显上调(P0.05);与模型对照组相比，加味生脉方显著提高血气指标检测值，降低炎症因子和氧化应激水平、心肌酶谱和心肌损伤标志物含量(P0.01),显著提高心肌线粒体呼吸链酶活性，下调心肌组织中P53、HIF-1α蛋白表达，上调BCL2蛋白表达(P0.01)。结论:加味生脉方能改善急性高原病大鼠血气指标，降低炎症因子水平，缓解心肌损伤，其作用机制可能与调节P53/HIF-1α/BCL2途径有关。