目的：探究补中益气汤对运动性疲劳的影响及其发挥疗效的潜在机制。方法：60只雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为空白组，模型组，补中益气汤低、中、高剂量组（4.1、8.2、16.4 g·kg~(-1)）及维生素C组（0.04 g·kg~(-1)）。空白组和模型组予生理盐水；各组每日灌胃0.2 m L，每日1次。除空白组外，其余组小鼠进行为期6周的负重力竭游泳实验。实验结束取血，留取胸腺、肝、脾、肾等脏器称质量。试剂盒检测小鼠血清乳酸（LD）、血尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）等指标以评估疲劳程度；苏木素-伊红（HE）染色观察骨骼肌病理形态；电镜下观察骨骼肌细胞超微结构重点观察线粒体形态变化；试剂盒检测骨骼肌腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量及骨骼肌线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ活性；实时荧光定量聚合酶链式反应（Realtime PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PTEN诱导激酶1(PINK1)介导的骨骼肌线粒体稳态通路关键基因m RNA及蛋白的表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠体质量增长率显著下降（P0.01）；胸腺指数显著降低（P0.01）；血清LD、BUN、MDA含量及CK活性显著提高（P0.01）;HE染色可见骨骼肌排列紊乱、肌纤维断裂，可见较多的炎症细胞浸润；电镜下可见骨骼肌细胞内线粒体形态改变（空泡状线粒体增多，嵴消失），线粒体数量减少；骨骼肌ATP含量及骨骼肌线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的活性显著降低（P0.01）;PINK1、E3泛素连接酶（Parkin）、与YRPW基序相关的分裂毛状/增强子（HEY1）、动力相关蛋白1(Drp1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)蛋白、螯合体1(p62)蛋白及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) m RNA表达水平明显升高（P0.05,P0.01）；与模型组比较，补中益气汤干预后，小鼠游泳力竭时间显著延长（P0.01）；体质量增长率显著提高（P0.01）；胸腺指数明显增加（P0.05,P0.01）；血清LD、BUN、MDA含量及CK活性明显降低（P0.05,P0.01）;HE染色可见骨骼肌排列整齐，炎症细胞减少；透射电镜下骨骼肌线粒体形态完整，嵴密集，线粒体数量增多；骨骼肌ATP含量及骨骼肌线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ活性明显提高（P0.05,P0.01）；骨骼肌组织中PINK1、Parkin、HEY1、LC3B、Drp1蛋白及HIF-1α基因表达水平明显升高（P0.05,P0.01）,p62水平显著降低（P0.01）。结论：补中益气汤能够有效防治运动性疲劳，并可能通过PINK1介导的HIF-1α/PINK1/Parkin与HIF-1α/HEY1/PINK1信号通路调控骨骼肌线粒体稳态发挥作用。