目的：结合数据非依赖型质谱采集（DIA）蛋白质组学技术，探讨刺五加提取物（ASH）治疗帕金森（PD）小鼠的作用机制。方法：使用α-突触核蛋白（α-Syn）过表达的转基因小鼠构建PD模型，随机分为模型组、刺五加组和美多芭组，另取同月龄雄性C57BL/6小鼠作为空白组，每组各8只。刺五加组给予61.25 mg·kg~(-1)的刺五加提取物，美多芭组给予97.5 mg·kg~(-1)的美多芭溶液，每日1次，灌胃20 d后，采用爬杆时间和自主活动次数对各组小鼠的运动能力进行评估；苏木素-伊红（HE）染色观察PD小鼠黑质区域神经元的变化情况；免疫组化（IHC）检测黑质区域酪氨酸羟化酶（TH）活性及纹状体区域α-Syn面密度；采用DIA定量蛋白质组学技术比较各组小鼠黑质区域的蛋白表达差异；并用IHC验证关键差异蛋白乳铁蛋白（Lactotransferrin）、神经源性位点切口同源物蛋白2(Notch2)、N-Myc下游调节因子2(Ndrg2)、跨膜蛋白166(TMEM 166)表达。用细胞增殖与活性检测试剂盒-8(CCK-8)考察刺五加提取物对α-Syn过表达的PD细胞模型活力的影响，并采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）与蛋白免疫印迹法（Western blot）检测α-Syn过表达的PD细胞中Lactotransferrin、Notch2、Ndrg2、TMEM 166蛋白及mRNA表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠爬杆时间显著延长，协调能力变差，自主活动次数降低（P0.01），神经元肿胀数量减少；与模型组比较，刺五加和美多芭可以显著缩短小鼠的爬杆时间，显著增加自主运动次数（P0.01），改善神经元的损伤。与空白组比较，模型组小鼠黑质区域TH活性显著下降，纹状体区域α-Syn堆积增多（P0.01）；与模型组比较，刺五加组TH活性明显增强，α-Syn堆积减少（P0.05）。蛋白质组学分析结果表明，与空白组比较，模型组共筛出464个差异表达蛋白（DEPs），其中323个上调，141个下调；与模型组比较，刺五加组共筛出DEPs 262个，其中85个上调，177个下调。京都基因与基因组百科全书（KEGG）显示刺五加主要调节了Notch信号通路，与空白组比较，模型组Notch2、Ndrg2和TMEM 166的表达上调，Lactotransferrin的表达下调（P0.01）；与模型组比较，刺五加组Notch2、Ndrg2和TMEM 166的表达下调（P0.05）,Lactotransferrin的表达上调（P0.01）,IHC结果与蛋白质组学一致。体外实验结果显示，与空白组比较，模型组细胞Notch2、Ndrg2和TMEM 166 mRNA与蛋白表达水平显著升高（P0.01）,Lactotransferrin mRNA与蛋白表达水平显著降低（P0.01）；与模型组比较，刺五加组细胞Notch2、Ndrg2、TMEM 166 mRNA与蛋白表达水平显著降低（P0.01）,Lactotransferrin mRNA与蛋白表达明显增加（P0.05,P0.01）。结论：ASH可能通过下调Notch2、Ndrg2的表达，从而协同阻断Notch信号通路，降低神经元损伤；并通过上调Lactotransferrin，下调TMEM 166的表达，来修复大脑铁积累，干预铁死亡，抑制线粒体自噬，阻止活性氧（ROS）损伤，保护神经细胞达到治疗帕金森的作用。