为建立一种快速鉴别诊断禽偏肺病毒B型（aMPV/B）和禽偏肺病毒C型（aMPV/C）的方法，根据aMPV/B和aMPV/C的保守基因片段，设计引物和荧光探针，通过优化探针浓度和反应温度，建立检测aMPV/B和aMPV/C的二重逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）方法。结果显示，aMPV/B和aMPV/C最佳探针浓度均为0.24 μmol/L，最佳反应温度为64 ℃；特异性结果显示，该二重RT-LAMP方法能特异性检测aMPV/B和aMPV/C，对禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)等12种常见禽源病原体扩增呈阴性；敏感性和干扰性结果显示，该二重荧光RT-LAMP方法检测aMPV/B和aMPV/C的敏感性均比普通RT-PCR高10倍，且抗干扰性良好；重复性结果显示，aMPV/B和aMPV/C二重荧光RT-LAMP方法的批内和批间重复性变异系数均小于3%；对临床样品检测结果显示，建立的二重RT-LAMP与RT-PCR检测结果高度相符。综上，本研究成功建立了二重可视化RT-LAMP检测方法，可为临床aMPV/B和aMPV/C防控提供技术支持。