本研究旨在建立蛋内沙门菌新型增菌方法，并对其在Sm24/Rif12/Ssq活疫苗降低散养蛋鸡污染率中的应用效果进行评价。首先在TSB预增菌肉汤中添加35 μg/mL硫酸亚铁和2 mmol/L丙酮酸钠，以提高低污染水平下沙门菌的检测灵敏度以及复苏处于活的不可培养（VBNC）状态的细菌。在开产后6个月内，每隔15 d随机收取40枚鸡蛋（共480枚）进行沙门菌分离鉴定；在每次采样时，使用0.1%蛋白胨水湿润的棉签从鸡舍随机采集10份环境样本。结果显示，优化的增菌肉汤mTSB显著提升蛋内沙门菌的检出率，对VBNC状态沙门菌的恢复显著优于TSB增菌（P0.01），接种肠炎沙门菌疫苗Sm24/Rif12/Ssq的散养母鸡所产鸡蛋的蛋内和蛋壳均未检出沙门菌。结果表明，mTSB适用于蛋内低污染水平和VBNC状态下沙门菌的分离，肠炎沙门菌活疫苗Sm24/Rif12/Ssq可降低散养地方品种鸡蛋的沙门菌污染风险，为保障散养蛋鸡的蛋品安全提供了可靠解决方案。