稳定表达KCTD1基因的PK15细胞系构建及其对FMDV和VSV复制影响的初步研究
利用慢病毒包装系统构建稳定表达钾通道四聚化结构域蛋白1(potassium channel tetramerization domain containing 1,KCTD1)的猪肾细胞系(PK15),并初步探索KCTD1对口蹄疫病毒(FMDV)和水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响,为深入理解KCTD1在病毒复制中的调控作用提供科学基础。本试验构建重组质粒PLV-puro-3×Flag-KCTD1-HA,并将其转染HEK293T细胞,分析其对VSV复制的影响。随后利用慢病毒包装技术成功获得稳定过表达KCTD1的PK15细胞系(PK15/KCTD1细胞系)。本试验采用Western-blot、qPCR和病毒滴度测定等方法,分析FMDV和VSV在PK15/KCTD1细胞系中的复制水平。结果显示,在PK15/KCTD1细胞系中,FMDV蛋白水平、RNA载量和病毒滴度显著高于空载体转染对照组细胞;同样在该细胞系中VSV的复制水平也显著高于对照组细胞。本研究成功构建了稳定表达KCTD1的PK15/KCTD1细胞系,并证实KCTD1对FMDV和VSV复制具有促进作用。
中国兽医科学
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