柔嫩艾美耳球虫丝氨酸蛋白酶抑制剂1对宿主细胞凋亡的影响
为探究柔嫩艾美耳球虫丝氨酸蛋白酶抑制剂1(EtSerpin1)对宿主细胞凋亡的影响,利用毕赤酵母系统表达EtSerpin1蛋白,并以合适的浓度添加到培养柔嫩艾美耳球虫感染的原代鸡胚盲肠上皮细胞培养基中,使用HE染色、Hoechst 33342与Annexin V-FITC/PI联合的三色荧光染色法、qRT-PCR以及Western-blot等检测EtSerpin1蛋白对宿主细胞柔嫩艾美耳球虫虫体感染率、凋亡率、Caspase-3酶活性以及凋亡关键因子表达的影响。结果显示,与单纯接种柔嫩艾美耳球虫组相比,添加EtSerpin1蛋白组的宿主细胞接种柔嫩艾美耳球虫4、24和96 h后的虫体感染率、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均极显著升高(P<0.01),而凋亡率、Caspase-3酶活性以及Bax mRNA和蛋白表达水平则显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低,表明EtSerpin1可以提高宿主细胞的虫体感染率,抑制由柔嫩艾美耳球虫引起的宿主细胞凋亡。
中国兽医科学
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