猫杯状病毒样颗粒疫苗的制备及免疫原性分析
为研发具有良好安全性和免疫原性的猫杯状病毒样颗粒疫苗,本研究构建了表达猫杯状病毒衣壳蛋白VP1蛋白载体pSMA-FCV-VP1,经大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,获得重组His-SUMO-VP1融合蛋白,然后在SUMO酶切组装液中切除His-SUMO标签组装获得FCV-VLPs。对获得的FCV-VLPs通过SDS-PAGE、Western-blot、纳米粒度仪以及透射电子显微镜等多种方法对其进行鉴定。结果表明,VP1条带符合预期目的条带大小(66 kDa),组装的VLPs粒径均一(30~40 nm),与猫杯状病毒粒子大小一致。将FCV-VLPs免疫小鼠后,小鼠血清中猫杯状病毒特异性抗体水平为1∶720,该病毒样颗粒能有效促进小鼠脾淋巴细胞增殖。本研究所制备的FCV-VLPs能诱发较强的免疫反应,为猫杯状病毒病疫苗的研发奠定了良好的基础。
中国兽医科学
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