从天津某动物医院收集病猫眼鼻拭子，经PCR检测猫疱疹病毒1型（FHV-1）核酸阳性且单一感染后，接种猫肾细胞系（CRFK）进行病毒分离以及传代培养。通过细胞病变观察、间接免疫荧光试验（IFA）与gD基因序列分析等，明确定该FHV-1分离株特性。PCR检测结果显示，仅1份样本为FHV-1阳性且为单一感染，该样本接种CRFK细胞后连传10代，PCR检测结果均为阳性，且病毒滴度均在1×10~(7.0) TCID_(50)/mL以上，将其命名为TJ（23）04株。分离株在CRFK细胞中诱导明显细胞病变效应且IFA显示与FHV-1糖蛋白gD单抗特异性结合的绿色荧光。gD基因序列比对显示TJ（23）04株与目前流行株亲缘关系较近，但与源自广东的华南虎FHV-1亲缘关系较远。本研究成功分离并鉴定了FHV-1 TJ（23）04株，揭示其在CRFK细胞中的生物学特性并证实其与国内外流行株具有较高的遗传同源性，为FHV-1的流行病学监测及病原学研究提供了重要数据支持。