本研究旨在基于体外试验和网络药理学探究蓼大青叶抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用、潜在活性成分和机制。首先，制备蓼大青叶水提液，测定其对Marc-145细胞的细胞毒性，通过RT-qPCR、Western-blot和间接免疫荧光法测定蓼大青叶水提液在不同时间和剂量下对PRRSV增殖的抑制作用。之后在HERB和TCMSP数据库收集蓼大青叶的活性成分和作用靶点，在CTD和GeneCards数据库收集PRRSV疾病靶点，获取它们的交叉靶点，构建相应的蛋白质互作网络，并进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。最后，对筛选出的核心靶点和主要活性成分进行分子对接验证。体外试验结果显示，蓼大青叶水提液的最大细胞安全浓度在PRRSV感染后24、36和48 h均显著抑制病毒增殖，低、中、高浓度的蓼大青叶水提液以剂量依赖方式抑制PRRSV增殖。网络药理学结果显示，蓼大青叶有10种活性成分，可作用于46个PRRSV疾病靶点。GO功能分析产生148条条目，KEGG通路富集分析产生116条信号通路。分子对接结果显示，蓼大青叶主要活性成分山柰酚、β-谷甾醇和千日红醇与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、雌激素受体1(ESR1)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和转化生长因子β1(TGFB1)等核心靶点均能良好结合，但β-谷甾醇与CASP3、ESR1、ICAM1和PPARG之间均无氢键形成。研究结果表明，蓼大青叶有直接抗PRRSV作用，并可能通过山柰酚和千日红醇等活性成分作用于CASP3、PTGS2、PPARG、ESR1、ICAM1和TGTB1等靶点发挥间接抗PRRSV作用。