为建立一种检测猪丁型冠状病毒的微滴式数字PCR定量方法,选择猪丁型冠状病毒M基因作为靶基因,设计并合成1组引物对和探针,并对反应体系及退火温度进行优化。结果显示:所建立的微滴式数字PCR定量方法检测猪丁型冠状病毒M基因的最低限为1.37 copies/μL,当模板浓度为10~0~10~4 copies/μL范围内与检测值具有良好的线性关系(R~20.99);检测的批内、批间变异系数为0.63%~4.63%,均低于5%,检测10种猪常见疫病病原(PEDV、PRV、TGEV、SADS-CoV、PoRV、PPV、PRRSV、PCV2、CSFV、FMDV-O、FMDV-A)核酸均为阴性;对130份临床样品进行猪丁型冠状病毒检测,微滴式数字PCR方法敏感性高于行业标准推荐的荧光PCR方法。本研究成功建立了一种特异性强、灵敏度高、重复性好的猪丁型冠状病毒微滴式数字PCR定量检测方法,为猪丁型冠状病毒的早期检测、定量诊断以及疫病净化提供技术保障。