为建立一种检测A型塞内卡病毒（SVA）非结构蛋白（NSP）3AB抗体的间接ELISA方法，本研究利用原核表达系统成功表达了重组SVA3AB蛋白，使用重组SVA3AB蛋白作为包被抗原，建立了间接ELISA方法。结果显示，重组SVA 3AB蛋白以可溶性形式表达，大小为18 k Da，能够与SVA抗体发生特异性反应。建立的间接ELISA方法：抗原最适包被质量浓度为1μg/m L；最佳封闭液为3%脱脂奶粉溶液；待检血清最佳稀释度为1∶640；酶标抗体最佳稀释度为1∶10 000；避光显色时间为10 min。该ELISA方法与猪口蹄疫病毒（FMDV）阳性血清、猪伪狂犬病病毒（PRV）阳性血清、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性血清、猪瘟病毒（CSFV）阳性血清以及猪圆环病毒（PCV）阳性血清均不发生交叉反应；敏感性达到1∶6 400；批内变异系数小于8%，批间变异系数小于10%。研究结果表明，该间接ELISA方法特异性强，敏感性高，重复性好，可用于临床上猪血清样品的检测，为SVA的鉴别诊断奠定了基础。