本试验以天冬氨酸蛋白酶(AP)为目标基因,探究其表达抑制后对卵形巴贝斯虫侵染长角血蜱的能力。利用5′/3′-RACE和PCR扩增天冬氨酸蛋白酶基因的全长和CDS,然后根据获得的序列设计siRNA干扰引物。通过颈静脉接种卵形巴贝斯虫的方式构建动物感染模型,将通过RNA干扰(RNAi)AP基因表达后的长角血蜱置于感染卵形巴贝斯虫牛体表,使蜱叮咬后检测蜱及蜱卵中卵形巴贝斯虫的感染率。结果显示,长角血蜱AP基因全长为1 497 bp,编码区序列为1 176 bp。该基因的RNAi可使AP的表达丰度降低81.91%(P=0.0030.01)具有显著性差异。感染动物过程中,相较于空白对照组和阴性对照组,qRT-PCR结果表明RNAi组的巴贝斯虫感染率下降。试验结果表明,干扰长角血蜱AP能有效抑制卵形巴贝斯虫的垂直传播,虽然该基因在蜱种间有较高保守性,但是其核酸序列仍然存在一定的差异。该基因第626~644位或第257~275位定点结合可作为潜在的阻断卵形巴贝斯虫传播的疫苗设计靶点,该位点可以发挥抑制/干扰AP表达的作用。该作用下可有效阻止卵形巴贝斯虫的垂直传播,而且可导致巴贝斯虫的感染水平的显著降低。因此,本研究不仅有助于揭示巴贝斯虫的生物学特性,也为疾病防控提供了潜在的新策略,为公共卫生提供更加有效的干预措施。