基于HPLC-Q-Exactive-MS及网络药理学探讨土茯苓七味散治疗溃疡性结肠炎的活性成分及作用机制
基于血清移行成分、网络药理学与实验验证策略探究土茯苓七味散(Tufuling Qiwei powder, TFLQW) 治疗溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis, UC) 的活性成分及作用机制。利用葡聚糖硫酸钠 (dextran sulfate sodium, DSS) 构建UC小鼠模型, 灌胃给予不同浓度的TFLQW, 采用ELISA法检测小鼠血清中的炎症因子水平, 并对小鼠结肠组织进行HE染色及病理学组织评分, 确定了TFLQW能够减轻UC小鼠的炎症表型。随后, 利用高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱高分辨质谱 (HPLC-Q-Exactive-MS) 技术对TFLQW血清移行成分进行鉴定, 经谱库检索、质谱识别流程, 辨识获得20种血清移行成分。利用Swiss Target Prediction数据库对血清移行成分进行作用靶点预测; 在疾病数据库GeneCards、OMIM、DisGeNet中检索UC疾病靶点; 用Venny 2.1.0软件绘制韦恩图得到交集靶点113个。利用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-靶点-疾病”网络, 使用Centiscape 2.2插件筛选核心成分, TFLQW中的巴马汀、表小檗碱、药根碱、小檗碱、漆黄素、白藜芦醇等成分可能是发挥药效的活性物质。利用String数据库分析蛋白相互作用 (protein-protein interaction, PPI), 并筛选得到关键靶点, TFLQW通过干预 STAT3、PIK3R1、SRC、PIK3CA、MAPK1和AKT1等靶点发挥治疗UC的作用。David数据库对交集靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析, 发现TFLQW治疗UC的通路主要涉及癌症、PI3K/AKT、C型凝集素受体等信号通路。对关键靶点和核心成分进行分子对接, 发现PIK3CA与各活性成分结合较好。利用Western blot法检测小鼠结肠组织中PI3K/AKT信号通路蛋白表达情况。本研究初步确证了TFLQW改善UC的作用, 并初步鉴定了TFLQW治疗UC的潜在药效成分及其作用通路, 并完成了体内实验验证。本研究为该复方的药效物质基础及作用机制深入研究提供参考, 也为TFLQW的临床用药提供理论支撑。动物福利和实验过程获得内蒙古医科大学医学伦理委员会批准 (伦理审批号: YKD202302093)。
药学学报
网络首发
立即查看 >
图书推荐
相关工具书