侵袭性真菌感染威胁人类尤其是免疫缺陷患者或者是患有严重潜在疾病的住院患者生命健康,给社会带来沉重的经济负担。耐药菌的出现、生物被膜的形成以及现有抗真菌药物的有限性和不良反应,增加了临床真菌感染治疗难度,亟需开发新型抗真菌药物。因此,本文基于前期的激酶化合物库抗真菌活性筛选研究,进一步考察了间变性淋巴瘤激酶(anaplasticlymphoma kinase,ALK)抑制剂3-[5-氯-2-({2-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)六氢吡啶-1-基]苯基}氨基)嘧啶-4-基]-1H-吲哚(HG-14-10-04,HG)对真菌的生长抑制活性及作用机制。通过微量液基稀释法、菌丝形成、生物被膜形成等实验系统评价HG的体外抗真菌活性。结果显示:化合物HG对敏感和耐药白念珠菌、克柔念珠菌、新生隐球菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌均表现真菌生长抑制和杀菌活性(MIC值为8～16μg·m L~(-1));HG能明显抑制真菌菌丝和生物被膜的形成,并破坏成熟生物被膜;且与两性霉素B合用表现协同抗真菌作用。通过转录组测序技术、流式细胞术、透射电镜等研究了HG的抗真菌机制。测序分析显示差异表达基因共有1 041个,其中上调的差异基因有666个,下调的差异基因有375个。根据GO功能分类结果显示:上调基因主要涉及核糖体生成、氧化还原等功能,下调基因主要涉及糖类、糖蛋白、糖脂的合成及其代谢,GPI锚合成,细胞骨架等功能。此外,HG能明显增加真菌内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;诱导细胞坏死;将细胞周期阻滞于G0/G1期;改变真菌细胞的超微结构尤其是细胞壁结构。因此,HG对真菌表现较好的生长抑制和杀菌活性,其机制可能与上调ROS,改变细胞超微结构尤其是细胞壁结构,使真菌细胞阻滞于G0/G1期有关,后期对其进一步的结构优化,有望为新型抗真菌先导化合物或候选药物的发现提供基础。