目的：开发一种高效液相色谱法（HPLC）同时测定醋延胡索中延胡索乙素和延胡索甲素的含量。方法：采用HPLC法，色谱柱选用Kromasil 100-5-C18柱，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）(55∶45)，流速：1.0 mL·min~(-1)，波长：280 nm下检测，柱温：30℃。结果：在该色谱条件下，两个对照品均达到基线分离，线性关系良好（r0.9995,n=5）；平均加样回收率为96.90%～100.05%,RSD为0.7%～1.9%。结论：该检测方法简便、灵敏、稳定、可靠，可作为醋延胡索的质量控制方法之一。