目的 了解2019—2023年西安市第三医院临床分离菌的分布特点及耐药性。方法 收集该院临床分离菌，采用纸片扩散法或药敏测试自动化仪器法按CHINET统一监测方案进行抗菌药物敏感性试验，按2023年CLSI文件标准判断结果。结果 2019—2023年该院临床分离菌6 621株，革兰阳性菌1 569株（23.7%）、革兰阴性菌5 052株（76.3%）。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和其他凝固酶阴性葡萄球菌（除假中间葡萄球菌和施氏葡萄球菌外）中甲氧西林耐药株的检出率分别为39.0%、62.3%和74.4%。甲氧西林耐药株对测试药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株，未发现万古霉素、利奈唑胺耐药株。肠球菌属中屎肠球菌对多数测试药物的耐药率均显著高于粪肠球菌，利奈唑胺耐药粪肠球菌和万古霉素耐药屎肠球菌的检出率分别为0.9%和0.4%。非脑膜炎肺炎链球菌中青霉素不敏感株的检出率为5.8%。肠杆菌目细菌中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌产ESBL的检出率分别为48.5%、 37.8%和47.2%。肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率是肠杆菌目细菌中最高者，分别为18.2%和17.9%；该目中其余菌属对碳青霉烯类药物仍呈高度敏感。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为22.5%和19.5%；鲍曼不动杆菌对两药的耐药率高，分别为65.0%和71.6%。结论 该院临床分离菌耐药形势严峻。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中近半数的菌株产ESBL；肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药率高；应做好细菌耐药性监测，各相关部门需加强协作以遏制耐药细菌的传播。